安捷倫1260液相色譜儀是一種高效的分離和分析技術(shù),通過(guò)在固定相(色譜柱)和流動(dòng)相(溶劑)之間相互作用,實(shí)現對混合物中成分的分離和檢測。HPLC在各種領(lǐng)域的科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著(zhù)重要作用。其基本原理是利用化合物在固定相(通常是填充在色譜柱中的吸附劑)和流動(dòng)相(溶劑)之間的分配系數差異,實(shí)現化合物的分離。樣品混合物在色譜柱中受到不同程度的吸附和解吸作用,從而在柱中分離成各個(gè)成分。檢測器檢測這些分離的化合物,并生成相應的信號。
1、儲液器
儲存流動(dòng)相:儲液器用于存儲足夠數量的流動(dòng)相,以確保整個(gè)分析過(guò)程中供應充足。儲液器一般配有溶劑過(guò)濾器,以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內。
防止氣泡:在儲液器中,流動(dòng)相需經(jīng)過(guò)脫氣處理,防止氣泡進(jìn)入系統引起噪聲,影響檢測結果。
2、泵
輸送流動(dòng)相:輸液泵將儲液器中的流動(dòng)相連續不斷地以高壓形式輸入液路系統,使樣品在色譜柱中完成分離過(guò)程。
調節流速穩定性:高壓泵的壓強通常為1.47~4.4×10^7^Pa,流速可調且穩定,有助于降低樣品在柱中的擴散效應,加快其在柱中的移動(dòng)速度,從而提升分辨率。
梯度洗脫裝置:在某些應用中,通過(guò)逐漸改變流動(dòng)相的組成來(lái)增加洗脫能力,從而提高分離效果。
3、進(jìn)樣器
裝載樣品:進(jìn)樣器是將樣品送入色譜柱的裝置,進(jìn)樣方式可以分為閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。
保證重復性:進(jìn)樣量恒定,這對提高分析樣品的重復性有益。
4、色譜柱
分離核心:色譜柱是整個(gè)色譜系統的心臟,其質(zhì)量直接影響到分離效果。色譜柱內填充有固定相,樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出。
材料種類(lèi):色譜柱的材料可以是優(yōu)質(zhì)不銹鋼、厚壁玻璃管或鈦合金等,柱子的長(cháng)度和內徑根據具體需求選擇,填料材料如硅膠或氧化鋁等。
5、檢測器
轉換信號:檢測器將色譜柱連續流出的樣品組分轉變成易于測量的電信號,被數據系統接收,得到樣品分離的色譜圖。
類(lèi)型多樣:常用的檢測器包括紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器和電化學(xué)檢測器等,根據樣品特性選擇合適的檢測器。
6、記錄儀
數據輸出:記錄儀或數據工作站接收檢測器傳來(lái)的電信號,轉換成圖譜形式打印出來(lái),供后續數據分析。
現代數據處理:現代HPLC設備多采用計算機軟件作為數據處理與記錄系統,可以實(shí)時(shí)監控和處理色譜數據,提高了分析的準確性和便捷性。